پلیت آماده Oxford Agar Base

محیط کشت آکسفورد آگار پایه (Oxford Agar Base)**

معرفی:

محیط کشت آکسفورد آگار یک محیط انتخابی و افتراقی است که به طور اختصاصی برای جداسازی و شناسایی لیستریا مونوسیتوژنز (Listeria monocytogenes) از نمونه‌های غذایی و بالینی طراحی شده است. این محیط به دلیل حساسیت و ویژگی بالا، در آزمایشگاه‌های کنترل کیفیت مواد غذایی و میکروبیولوژی بالینی کاربرد گسترده‌ای دارد.

ترکیبات اصلی:

1. پپتون و عصاره مخمر:  

  - تأمین مواد مغذی ضروری برای رشد لیستریا.  

2. لیستریا انتخابی ساپلیمنت (مکمل انتخابی):  

  - حاوی اسفوفاکسیمین، کولیستین سولفات، سیکلوهگزیمید، فسفومایسین، و اکروفلاوین که رشد باکتری‌های مزاحم را مهار می‌کنند.  

3. کلرید لیتیم:  

  - عامل انتخابی اضافی برای مهار باکتری‌های گرم مثبت (به جز لیستریا).  

4. آگار:  

  - عامل جامدکننده.  

مکانیسم افتراقی:

- لیستریا مونوسیتوژنز با تولید آنزیم فسفاتاز، ترکیبات فسفاته در محیط را هیدرولیز می‌کند.  

- در نتیجه، کلونی‌های لیستریا به رنگ سیاه با هاله‌ای شفاف (به دلیل هیدرولیز اسکولین) ظاهر می‌شوند.  

روش کار:

1. تهیه محیط:  

  - پودر آکسفورد آگار را در آب مقطر حل کرده و اتوکلاو کنید.  

  - پس از خنک شدن تا ۵۰°C، مکمل انتخابی را اضافه کنید.  

2. کشت نمونه:  

  - نمونه غذایی یا بالینی را روی محیط کشت داده و به صورت خطی گسترش دهید.  

3. انکوباسیون:  

  - به مدت ۲۴-۴۸ ساعت در دمای ۳۷°C در شرایط میکروآئروفیلیک (۵-۱۰% CO₂) انکوبه کنید.  

تفسیر نتایج:

- کلونی‌های سیاه با هاله شفاف:  

 - لیستریا مونوسیتوژنز (مثبت برای فسفاتاز و هیدرولیز اسکولین).  

- کلونی‌های خاکستری یا بی‌رنگ:  

 - سایر گونه‌های لیستریا (مثل L. innocua) که ممکن است فسفاتاز تولید نکنند.  

- عدم رشد:  

 - نمونه فاقد لیستریا یا مهار رشد توسط عوامل انتخابی.  

کاربردها:

- صنایع غذایی:  

 - تشخیص لیستریا در محصولات لبنی، گوشتی، و سبزیجات آماده مصرف.  

- آزمایشگاه‌های بالینی:

 - جداسازی لیستریا از نمونه‌های CSF، خون، و بافت‌ها.  

- پایش محیطی:  

 - کنترل آلودگی در خطوط تولید مواد غذایی.  

مزایا:

- حساسیت بالا: 

 - قادر به تشخیص حتی تعداد کم لیستریا در نمونه‌های پیچیده.  

- ویژگی خوب:  

 - مهار مؤثر باکتری‌های مزاحم (مانند استافیلوکوک‌ها و انتروباکتریاسه).  

- نتایج سریع:  

 - کلونی‌ها معمولاً پس از ۲۴ ساعت قابل مشاهده هستند.  

محدودیت‌ها:

- نیاز به مکمل:  

 - بدون افزودن ساپلیمنت انتخابی، محیط عملکرد مناسبی ندارد.  

- شرایط انکوباسیون خاص:  

 - نیاز به محیط میکروآئروفیلیک دارد.  

- تأیید نهایی:  

 - نتایج باید با تست‌های بیوشیمیایی یا مولکولی (مانند PCR) تأیید شوند.  

نکات کلیدی:

- از گرم‌کردن بیش از حد مکمل خودداری کنید (حساس به حرارت).  

- نمونه‌های غذایی باید قبل از کشت، به روش مناسب (مانند هموژنیزاسیون و غنی‌سازی) آماده شوند.  

- برای افزایش حساسیت، می‌توان از مرحله غنی‌سازی در محیط BUFFERED LISTERIA ENRICHMENT BROTH استفاده کرد.  

این محیط به‌عنوان استاندارد طلایی در تشخیص لیستریا مونوسیتوژنز شناخته می‌شود و در پروتکل‌های معتبری مانند ISO 11290 استفاده می‌گردد.